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甘油菌種復(fù)蘇保存步驟與注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):524 更新時(shí)間:2024-07-09

甘油菌種復(fù)蘇保存涉及幾個(gè)關(guān)鍵步驟,?包括菌種的保存、?復(fù)蘇以及再次保存的過程。?以下是詳細(xì)的步驟和注意事項(xiàng):?

菌種保存:?

將菌種接種于LB液體培養(yǎng)基,?并在對(duì)數(shù)生長期時(shí),?當(dāng)培養(yǎng)體系內(nèi)渾濁可見時(shí),?進(jìn)行保存。?

準(zhǔn)備50%濃度的甘油溶液,?可以通過等體積的蒸餾水和甘油混合得到。?

在無菌條件下,?將菌液與50%濃度的甘油按1:1的比例混合,?使甘油終濃度達(dá)到25%。?

將混合液轉(zhuǎn)移至2ml離心管中,?并在-20°C冰箱內(nèi)保存。?這種條件下,?菌種的保存有效期為1年。?若需長期保存,?建議在-70°C或-80°C下凍存,?保藏時(shí)間一般為2-4年左右12。?

菌種復(fù)蘇:?

在使用前,?將保存的菌種在30°C水浴中解凍。?

解凍后,?將菌液接種到固體培養(yǎng)基上,?并在適宜條件下培養(yǎng)24-48小時(shí),?以恢復(fù)菌種的活性。?

再次保存:?

復(fù)蘇后的菌種可以在新的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),?并再次進(jìn)行甘油保存。?這一過程確保了菌種的長期保存和可用性。?

注意事項(xiàng):?

確保所有使用的工具和容器都經(jīng)過適當(dāng)?shù)臏缇幚恚?以避免污染。?

在操作過程中保持無菌條件,?以防止外界微生物的污染。?

正確的保存和復(fù)蘇方法對(duì)于保持菌種的活性和純度至關(guān)重要。?

保存的溫度對(duì)菌種的長期存活有很大影響,?低溫條件有利于延長保存時(shí)間。

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